鉴定Raf-1 S471是一个新的磷酸化位点，对Raf-1和B-Raf激酶活性和MEK结合至关重要。
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朱杰，Balan V, Bronisz A, Balan K，孙华，Leicht DT，罗震，秦杰，Avruch J, tzzivion G
鉴定Raf-1 S471是一个新的磷酸化位点，对Raf-1和B-Raf激酶活性和MEK结合至关重要。
Mol Biol Cell, 2005 10月;16(10):4733-44。Epub 2005年8月10日。
- PubMed ID
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16093354 (PubMed视图］
- 摘要
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Ras-Raf-MAPK级联是一个关键的生长信号通路，其不受控制的激活导致细胞转化。虽然沿着级联的信号传输的一般特征已经被合理地定义，但Raf激活背后的机制仍然不完全清楚。在这里，我们发现Raf-1去磷酸化，主要是在表皮生长因子(EGF)诱导的位点，消除Raf-1激酶活性。利用质谱技术，我们在体内发现了5个新的Raf-1磷酸化位点，其中S471位于Raf-1激酶结构域的VIB亚域。突变分析表明，Raf-1 S471对Raf-1激酶活性及其与丝裂原活化蛋白激酶(MEK)的相互作用至关重要。类似地，对应的B-Raf位点S578突变导致激酶失活，这表明Raf激酶激活需要相同的Raf-1和B-Raf磷酸化。重要的是，自然发生的，癌症相关的B-Raf激活突变V599E抑制了S578A突变，这表明在该区域引入带电残基消除了激活磷酸化的需要。我们的研究结果证明了特定egf诱导的Raf-1磷酸化位点在Raf-1激活中的重要作用，确定了Raf-1 S471作为一个新的磷酸化位点对Raf-1和B-Raf激酶活性至关重要，并指出V599E突变通过模仿S578位点的磷酸化激活B-Raf的可能性。