经典非盐失3 β -羟基类固醇脱氢酶缺乏症两兄妹先天性肾上腺增生的分子基础。
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罗睿梅E，桑切斯R，司马德J，张玉婷，王杰，庞s，李丽芳
经典非盐失3 β -羟基类固醇脱氢酶缺乏症两兄妹先天性肾上腺增生的分子基础。
中华内分泌杂志1994 10月;79(4):1012-8。
- PubMed ID
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7962268 (PubMed视图]
- 摘要
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我们报告了二型3 β -羟基类固醇脱氢酶(3 β - HSD)基因突变的兄弟姐妹，男性和女性，由经典的非盐损失3 β - HSD缺乏症引起的先天性肾上腺增生。在儿童时期，出生时生殖器不明确的男性兄弟姐妹和出生时生殖器正常的女性兄弟姐妹都表现出轻度雄激素过剩的症状;两组肾小球带功能均正常。青春期性腺动力学研究表明，尽管他们自发的青春期成熟，但在兄弟姐妹中存在部分性腺3 β HSD缺陷。通过聚合酶链式反应扩增了II型3 β HSD基因的5′区、I-II、III和IV外显子以及部分邻近内含子，并对其进行测序。在兄弟姐妹和他们的母亲中，在一个等位基因中，在内含子III(外显子IV上游的六个碱基)中发现了一个相同的单核苷酸取代突变。这种突变，G到A在核苷酸6651，可能会创建一个新的剪接结，并影响正常剪接的信使核糖核酸。在兄妹二人的另一个等位基因中，外显子第IV号密码子(G129R)上发现了从GGG (Gly)到AGG (Arg)的错义突变。我们评估了G129R错义突变在COS-1细胞中短暂表达后，通过体外分析位点定向突变产生的突变重组酶对酶活性的影响。使用转染细胞的均质液，g129r3 beta HSD酶显示孕烯醇酮的Km值为10 +/- 2 mumol/L，而野生型II型3 beta HSD酶的Km值为1.00 +/- 0.03 mumol/L。 When dehydroepiandrosterone was used as substrate, the Km value for G129R3 beta HSD was 14 +/- 2 mumol/L compared with 2.1 +/- 0.2 mumol/L for the wild-type II 3 beta HSD enzyme. In addition to an apparent decrease in affinity, the G129R mutation caused a marked decrease in the apparent relative specific activity, thus leading to apparent relative specific efficiencies (relative specific activity/Km) of 2.0% and 4.7% that of the normal type II 3 beta HSD using pregnenolone or dehydroepiandrosterone as substrate, respectively. It appears likely that this low level of activity is sufficient to prevent salt loss, but it is also possible that part of the enzymatic activity comes from the putative remaining percentage of correctly spliced n6651 allele in these patients.