人HGPRTase、PRPP、Mg2+和抑制剂HPP的三元复合结构揭示了柔性环参与底物结合。
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Balendiran GK, Molina JA, Xu Y, Torres-Martinez J, Stevens R, Focia PJ, Eakin AE, Sacchettini JC, Craig SP 3
人HGPRTase、PRPP、Mg2+和抑制剂HPP的三元复合结构揭示了柔性环参与底物结合。
蛋白质科学，1999年5月;8(5):1023-31。
- PubMed ID
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10338013 (PubMed视图］
- 摘要
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用丙氨酸取代人次黄嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRTase)的Lys68位点，以利用这种活性较低的酶形式，进一步了解HGPRTase的结构-活性关系。虽然这种取代只导致结合焦磷酸盐或磷酸核糖基焦磷酸盐的Km值增加了极小的(1- 3倍)，但正向和反向反应的催化效率(k(cat)/Km)严重降低(6- 30倍)，并且突变酶在α - d -5-磷酸核糖基-1-焦磷酸盐(PRPP)和核苷酸的结合中表现出积极的协同作用。人HGPRTase的K68A型与7-羟基[4,3-d]吡唑啉嘧啶(HPP)和Mg PRPP共结晶，并报道了精细结构。建立在[(Fo - Fc)phi(calc)]电子密度中的PRPP分子显示了Mg PRPP与焦磷酸盐结合域中的酶残基之间的原子相互作用，以及在一个长柔性环(Leu101到Gly111残基)中关闭在活性位点上。环的闭合揭示了环中保守的SY二肽的功能作用，以及一种痛风性关节炎(S103R)的分子基础。此外，闭环构象提供了与人HGPRTase催化机制相关的结构信息。