诱变folC基因编码folylpolyglutamate synthetase-dihydrofolate合成酶在大肠杆菌。
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驾车Kimlova LJ, Pyne C, Keshavjee K, J, Beebakhee G, Bognar
诱变folC基因编码folylpolyglutamate synthetase-dihydrofolate合成酶在大肠杆菌。
拱生物化学Biophys。1991年1月,284(1):9到16。
- PubMed ID
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1989505 (在PubMed]
- 文摘
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folC基因的大肠杆菌,克隆pUC19向量,由进步的诱变处理删除从5’和3’末端和标签链接器插入。基因的5 '删除,发起者ATG密码子,产生截断基因产品,数量减少,从一个次要的起始点。这个网站的最可能的位置GTG密码子位于35正常开始网站的密码子的下游。这个产品可以补充folC大肠杆菌的突变菌株SF4以及应变folC基因删除。提取的具体活动的突变酶4 - 16%,野生型酶的folylpolyglutamate合成酶活性和二氢叶酸合成酶活性的6 - 19%。所表达的蛋白质突变体的相对量,与野生型相比,在大型细胞与相对特定的活动,表明突变酶的kcat与野生型相似。突变体与14种氨基酸从羧基末端还能补充folC删除删除突变。七的链接器插入分散通过基因的编码区显示互补的folC突变菌株SF4但这些插入突变体能够补充包含删除folC基因的菌株。羧基末端或链接器插入突变体都没有一个特定的活动超过0.5%的野生型酶。二氢叶酸合成酶和folylpolyglutamate合成酶活动表现同样的突变体,同时保留大部分的野生型氨基末端活动删除和非常低的羧基末端缺失和链接器插入突变体。 These studies are consistent with a single catalytic site for the two activities catalyzed by this enzyme.