多个环核苷酸磷酸二酯酶在人类小梁网细胞。
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周L,汤普森WJ,波特DE
多个环核苷酸磷酸二酯酶在人类小梁网细胞。
角膜切削Vis Sci投资。1999年7月,40 (8):1745 - 52。
- PubMed ID
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10393044 (在PubMed]
- 文摘
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目的:描述环核苷酸磷酸二酯酶同工酶活动在人类的小梁网细胞和猪小梁网细胞的主要文化。方法:未及乙酰化酸提取的用于确定环腺苷酸的变化(营)和环quanosine一磷酸(cGMP)在人类的小梁网细胞与同种型选择性磷酸二酯酶抑制剂治疗。环核苷酸磷酸二酯酶活动使用两步放射性同位素测量过程(Thompson)。酶活性在人类细胞的上清液分馏使用阴离子交换色谱法。此外,人类和猪小梁网细胞转录的磷酸二酯酶family-specific亚型进行了研究通过逆转录-聚合酶链反应和核苷酸序列。结果:完整的人类细胞,选择性磷酸二酯酶4抑制剂(rolipram)和5 (E4021)基因家族是有效增加环核苷酸积累对异丙肾上腺素或硝普酸钠,分别。营和cGMP水解活动,解决使用Trisacryl M阴离子交换色谱法,显示一个阵营磷酸二酯酶峰值最小灵敏度cGMP但适度被rolipram和cGMP被E4021敏感抑制磷酸二酯酶峰值。cGMP磷酸二酯酶的进一步评估证明Michaelis-Menten E4021动力学和竞争性抑制。信使RNA转录磷酸二酯酶4、5、7同功酶被孤立在人类的小梁网细胞。然而,在猪小梁网细胞只对磷酸二酯酶同功酶4和5同功酶被发现。 CONCLUSIONS: Human trabecular meshwork cells express phosphodiesterase 4, 5, and 7 gene family isoforms and enzyme activities, suggesting that selective isoform inhibitors could be used to augment the actions of antiglaucoma drugs that use cyclic nucleotides as second messengers.