人蛋氨酸腺苷转移酶(MAT II) β调控亚基的克隆、表达和功能表征
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LeGros HL Jr, Halim AB, Geller AM, Kotb M
人蛋氨酸腺苷转移酶(MAT II) β调控亚基的克隆、表达和功能表征
生物化学学报，2000,28(4):2359- 2366。
- PubMed ID
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10644686 (PubMed视图］
- 摘要
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MAT II是蛋氨酸腺苷转移酶(MAT)的肝外形式，由催化α (2)/ α(2’)亚基和非催化β亚基组成，被认为具有调节功能。克隆了编码人MAT II β亚基的全长cDNA，发现其编码一个334个氨基酸的蛋白，计算分子量为37552。序列同源性分析表明，该酶与催化tdp连接糖还原的细菌酶相似。将β亚基cDNA克隆到pq -30表达载体中，在大肠杆菌中表达的重组His标记蛋白被人MAT II抗体、复制天然β亚基蛋白序列的合成肽和rβ蛋白识别。MAT II α(2)或β亚基之间没有交叉反应性。没有一种抗β亚基抗体与大肠杆菌宿主细胞的蛋白质提取物发生反应，这表明这些细菌没有β亚基蛋白。有趣的是，rbeta亚基与大肠杆菌和人类MAT α亚基相关。这种结合改变了两种酶的动力学性质，降低了l -蛋氨酸的MAT K(m)。总之，这些数据表明我们已经克隆并表达了人类MAT II β亚基，并证实了其长期以来被怀疑的调节功能。这一知识提供了一种在哺乳动物细胞中调节MAT活性和AdoMet水平的分子方法。