因子VII 304-Gln的纯化和鉴定:从临床未受影响的男性中分离出的活性降低的变异分子。
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O'Brien DP, Gale KM, Anderson JS, McVey JH, Miller GJ, Meade TW, Tuddenham EG
因子VII 304-Gln的纯化和鉴定:从临床未受影响的男性中分离出的活性降低的变异分子。
《血》1991 july 1;78(1):132-40。
- PubMed ID
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2070047 (PubMed视图］
- 摘要
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因子VII (FVII)是血浆丝氨酸蛋白酶酶原，与细胞受体组织因子(TF)结合，启动血液凝固。一名无临床出血倾向的47岁男性，在使用兔脑TF进行一期试验时，发现其血浆FVII活性未检测到，但使用重组人TF和1.04 U/mL FVII抗原时，其血浆FVII活性为0.3 U/mL。从他的血浆中纯化的变体FVII在十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳上显示了与野生型酶原相同的迁移。通过酶动力学分析，以FX为底物的突变体的Km比普通FVII高12倍。此外，变体FVII无法与野生型FVII竞争有限的兔TF结合位点。使用配体印迹程序直接证明了与正常FVII相比，重组人TF与变体FVII的结合减少。白细胞DNA的遗传分析显示，在密码子304处的提议基因发生了G到a突变，导致蛋白酶催化区域的精氨酸残基被谷氨酰胺取代。我们得出结论，这个区域的FVII分子是重要的功能。