昆虫细胞分泌功能人类钴胺传递蛋白II isoproteins利用杆状病毒表达系统。
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Quadros EV, Sai P, Rothenberg SP
昆虫细胞分泌功能人类钴胺传递蛋白II isoproteins利用杆状病毒表达系统。
血。1993年3月1日,81 (5):1239 - 45。
- PubMed ID
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8443384 (在PubMed]
- 文摘
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钴胺传递蛋白II (TCII)是维生素B12 (Cbl、维生素B12)结合蛋白在哺乳动物血浆促进细胞吸收的维生素。获得人类TCII足够数量分析研究互补DNA(互补)编码TCII插入到质粒PVL 1393和杆状病毒表达TCII通过同源重组在Spodoptera frugiperda (SF9)昆虫细胞通过cotransfection野生型病毒。在优化条件下,SF9分泌细胞重组病毒感染的2到4微克每毫升TCII培养基。TCII SF9细胞没有积累,似乎持续分泌如前面观察在人工培养的内皮细胞。纯化的重组TCII相同分子量通过sds - page人类TCII纯化。的重组TCII交叉作用的抗血清对本土人类TCII结合Cbl真核细胞和促进Cbl的吸收通过绑定到受体TCII-Cbl K562细胞的质膜。氨基酸序列分析纯化重组TCII识别两个多肽,一个相同的氨基酸序列推导的互补和第二个缺乏第一和第二n端残留。这些序列是相同的两个TCII多肽纯化从科恩分数三世汇集人类的等离子体。两种形式的重组TCII有相同的等电点的两种主要isoprotein形式TCII在人类血清。由于杆状病毒构建包含一个单一的cDNA,只可以编码一个氨基酸序列,生成的两个isoproteins TCII必须重组机制以外的其他等位基因特定的表达式。 A plausible mechanism for generating isoproteins of nonglycosylated peptides, such as TCII, may be by splicing of the leader peptide at alternative sites.