分析天然和定点argininosuccinate裂合酶基因的突变。
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巴博萨P Cialkowski M O ' brien我们
分析天然和定点argininosuccinate裂合酶基因的突变。
生物化学杂志。1991年3月15日,266 (8):5286 - 90。
- PubMed ID
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1705937 (在PubMed]
- 文摘
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Argininosuccinic酸尿是一个新陈代谢的先天的错误由于argininosuccinate裂合酶的基因缺陷。为了确定疾病的分子基础,RNA分离培养皮肤成纤维细胞来源于四个不相关的患者reverse-transcribed和放大使用聚合酶链反应和产品是克隆和测序。确定了三个单基地错义突变:Arg111——Trp, Gln286——参数,Arg193——Gln。一个基地在Gln454琥珀突变被确认。一对突变涉及13-base内删除外显子13日指出,大多数成熟的RNA源自这等位基因被删除整个包含外显子,外显子,而不是13基地删除。最后观察突变的外显子2被删除从成熟的RNA。这个删除是不确定的分子基础。的八个潜在突变出现在四个细胞系研究,六个突变被确定和进一步的数据表明,剩下的两个身份不明的突变是不同于确认。创建两个基因定点突变的cDNA、Lys51——Asn和His89——Gln,这些在酵母表达。Lys51突变引起了近似2倍减少活动和His89突变导致了大约10倍减少活动。 The combination of determination of naturally occurring mutations and the study of the effect of site-directed mutations on the activity of argininosuccinate lyase provide insight into the amino acid residues critical to the function of the enzyme.