K562(人慢性髓性白血病)细胞中血栓素A2受体的克隆和药理学特性。
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迪安吉洛DD，戴维斯MG，阿里S，多恩GW第二
K562(人慢性髓性白血病)细胞中血栓素A2受体的克隆和药理学特性。
中华药物学杂志1994年11月;271(2):1034-41。
- PubMed ID
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7965765 (PubMed视图］
- 摘要
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在血栓素A2受体(TXR)存在组织特异性亚型方面，药理学和分子证据存在冲突。全长TXR互补DNA (cDNA)是从一个血小板样细胞系中克隆出来的。对其进行了表达和药理鉴定。多组织TXR转录本Northern分析显示与K562慢性髓性白血病信使RNA强杂交。因此，筛选出K562 cDNA文库，并分离出全长TXR cDNA (K562TXR)。K562TXR编码一种与先前描述的胎盘TXR cDNA相同的蛋白质，除了一个氨基酸取代(Glu21—>Lys)。与K562细胞上的血栓烷受体相似，瞬时表达在HEK 293细胞中的K562TXR (K562TXR/293)结合了血栓烷激动剂125I标记的[1S-(1 α，2 β (5Z)，3 α -(1E,3S)，4 α]-7-[3-(3-羟基-4-(对碘苯氧基)-1-丁烯基)-7-氧双环-[2.2.1]庚烷-2-基]-5-庚烯酸([125I]BOP)， Kd为5.5 +/- 1.1 nM，Bmax为289,056 +/- 60,220个位点/细胞，Hill系数为-0.94 +/- 0.01 (n = 6)。K562TXR/293细胞对血栓素激动剂(15s -羟基-11 α，9 α(环氧甲烷)-前列腺- 5z, 13e -二烯酸)也表现出浓度依赖性的细胞内钙增加。与K562TXR/293中观察到的单个[125I]BOP结合位点相比，[125I]BOP与胎盘膜结合导致希尔系数显著小于统一，具有统计学上优势的双位点结合模型[KdH 0.63 +/- 0.18 nM, KdL 12.5 +/- 5.0 nM, bmax分别为29 +/- 9和212 +/- 41 fmol/mg蛋白(n = 7)]。(摘要删节至250字)