定点诱变研究散播他们的角色的守恒的天冬氨酸残基在人类谷胱甘肽S-transferase P1-1。
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香港KH、井上H,高桥K
定点诱变研究散播他们的角色的守恒的天冬氨酸残基在人类谷胱甘肽S-transferase P1-1。
蛋白质Eng。1993年1月,6 (1):93 - 9。
- PubMed ID
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8433974 (在PubMed]
- 文摘
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散播他们守恒的天门冬氨酰残基(Asp57 Asp98和Asp152)在人类谷胱甘肽S-transferase P1-1被替换成丙氨酸通过定点诱变获得突变体(D57A D98A和D152A)。Asp98替代丙氨酸导致减少S-hexyl-GSH-agarose的亲和力,KmGSH增长5.5倍和2.9倍的增加I50 S-hexyl-GSH GSH-CDNB接合。Asp98似乎参与谷胱甘肽通过氢键的绑定alpha-carboxylate gamma-glutamyl残渣的谷胱甘肽。的kcat D98A小于野生型的2.6倍,以及谷胱甘肽的硫醇基的pKa绑定在D98A大约0.8 pK单位高于野生型。Asp98似乎也在一定程度上导致谷胱甘肽的激活。另一方面,大多数的动力学参数D57A和D152A类似野生型。然而,热稳定性D57A和D152A显著低于野生型。Asp57 Asp152似乎是重要的维持适当的酶的构象。