表达、纯化和初步鉴定细菌的人类对蛋白质酪氨酸激酶表达系统。
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引用
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太阳G, Budde RJ
表达、纯化和初步鉴定细菌的人类对蛋白质酪氨酸激酶表达系统。
拱生物化学Biophys。1997年9月1;345 (1):135 - 42。
- PubMed ID
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9281320 (在PubMed]
- 文摘
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蛋白酪氨酸激酶是细胞v-Yes同族体,禽流感Y73肉瘤病毒的致癌蛋白产品。是的是Src家族的一员,其激活与多种人类癌症有关。人类是没有以前保持酶的特点。这种酶进行生化特征,我们表达了它作为一个融合蛋白在大肠杆菌与谷胱甘肽S-transferase,允许在单步净化。的affinity-purified GST-Yes特定活动的1.3 nmol最低为1与polyE4Y mg-1衬底和公里值100 microg ml-1 polyE4Y和70年microM ATP-Mg。酶有偏爱镁对锰离子的最大的活动。二价金属阳离子的活动是有两个基本功能:一是部分phosphate-donating衬底ATP-Mg和其他重要的催化剂。经历自身磷酸化酶没有明显的激活。最后,我们表明,该酶灭活通过与蛋白质酪氨酸激酶埋头在ATP-Mg-dependent孵化方式,表明细胞是可以由埋头磷酸化。这些代表了人类对蛋白质酪氨酸激酶的生化特征。