识别一个错义突变成人患者糖原病II型表达只有一个等位基因。
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Martiniuk F,梅勒米,锥子,Tzall年代,赫塞豪恩K,钟N,赫塞豪恩R
识别一个错义突变成人患者糖原病II型表达只有一个等位基因。
DNA细胞杂志。1991年11月,10 (9):681 - 7。
- PubMed ID
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1684505 (在PubMed]
- 文摘
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溶酶体酶酸α-葡糖苷酶(棉酚)或酸性麦芽糖酶缺乏病2型糖原存储。我们试图确定疾病的分子基础的成人患者,常见的酶活性很低很相似infantile-onset形式和磷酸化之前报道的缺陷。我们构建的互补和基因组DNA库从病人的细胞系(通用汽车1935)和编码区核苷酸序列的决定。有三个碱基对替换在一个等位基因(C1935到;G2446和C2780 T),所有预测氨基酸变化(Glu asp - 645;瓦尔- 816 Ile和刺- 927 Ile)。确定这三个碱基对的替换导致酶活性丧失,我们下一个利用primer-directed诱变和瞬时基因表达在一个SV40-immortalized GAA-deficient纤维母细胞细胞系。只有构建包含G2446突变(val - 816 Ile)失去了棉酚酶活性,而其他两个替换(包括刺- 927 Ile变化预测损失潜在的网站N-linked糖基化和甘露糖磷酸化)每个导致酶活性的控制。在基因组DNA rflp分析,以及三个碱基对改变序列分析,表明病人基因化合物。我们下一个消化扩增互补脱氧核糖核酸(RNA) reverse-transcribed菌进行Aat II检测1935碱基对替换,发现几乎所有的mRNA来源于三个碱基对的等位基因替换。(抽象截断在250字)