(稳定、高效表达人类白细胞介素- 6的cDNA在哺乳动物细胞基因转移)。
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引用
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陈QY
(稳定、高效表达人类白细胞介素- 6的cDNA在哺乳动物细胞基因转移)。
中华钟刘9月杂志。1992;14 (5):340 - 4。
- PubMed ID
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1291290 (在PubMed]
- 文摘
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继逆转录PCR扩增,人类白细胞介素- 6 (il - 6) cDNA克隆人类扁桃体单核细胞总RNA的激活。印迹显示特定的乐队,和它的DNA序列表明片段的长度是650个基点,生成完整的编码区和5’和3’非翻译的一部分地区。人类il - 6的顺序似乎是守恒的。在429位置观察到一个核苷酸的变化,但这种变化并不影响氨基酸组成。将克隆的cDNA插入逆转录病毒载体XM-6后,重组是打包在PA317细胞和amphotropic病毒效价达到5 x 10 (5) CFU /毫升。人类il - 6表达的哺乳动物细胞系SP2/0细胞,后被构造的逆转录病毒感染。G418抗性SP2/0细胞分泌il - 6的分泌。上层清液能够维持体外il - 6的增长依赖T1165细胞系。北部的污点分析转染SP2/0细胞显示明显升高il - 6的消息,与T 1165生物测定的结果一致。表达稳定在12个月期间的观察。 The hybridoma cells, formed after fusion of the transfected SP2/0 cells and lymphocytes, exhibited accelerated growth.