结构、稳定性和生物学性质的氨基端截短形式的重组人白细胞介素- 6包含一个二硫键。
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布列塔尼的J, La Fiura Bertolero F, G奥尔西尼,Valsasina B, Ziliotto R, De菲利皮主持V, Polverino De Laureto P,丰塔纳
结构、稳定性和生物学性质的氨基端截短形式的重组人白细胞介素- 6包含一个二硫键。
欧元。1995 1月15日,227 (2):573 - 81。
- PubMed ID
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7851440 (在PubMed]
- 文摘
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185 -残渣链的变异物种的人类白细胞介素- 6缺乏22-residues n端和与半胱氨酸- - > Ser替换位置45 - 51在大肠杆菌生产。163 - des残留蛋白质(A1-S22)——(C45S, c51)白细胞介素- 6,包含一个二硫桥,形成包涵体。变异白细胞介素- 6在6 M盐酸胍可溶性,受到氧化重折叠和纯化同质性的硫酸铵沉淀和疏水色谱法。纯洁的变异物种建立了电泳,isoelectrofocusing和反相高效液相色谱法及其结构的身份被完整蛋白质的氨基端测序检查和几个蛋白水解片段。电喷雾质谱的分析变异白细胞介素- 6给出了分子质量18695 + / - 2 Da与计算值基本一致。圆二向色、荧光发射和二阶导数紫外吸收光谱表明,变异白细胞介素- 6保持整体的二级和三级结构,以及稳定的特点,野生型重组人白细胞介素- 6。变异白细胞介素- 6的urea-induced展开,监控远紫外圆二向色性测量的地区,是一个高度合作的过程中点在5.5 M尿素变性。可逆的变异白细胞介素- 6的数据由尿素被用来计算值为20.9 + / - 0.4 kJ。mol-1热力学稳定的蛋白质在25摄氏度没有变性剂。变异白细胞介素- 6的生物活性是评价体外的杂种细胞增殖试验,并在猴子体内通过测量血栓形成。剂量/响应突变的影响是相当甚至高于野生型蛋白。 Overall the results of this study show that mutant interleukin-6 is a biologically active cytokine, which could find practical use as a therapeutic agent.