biotin-streptavidin交互可以可逆地打破了使用水在升高的温度下。

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霍姆博格,Blomstergren,北方O,卢卡奇米,Lundeberg J, Uhlen M

biotin-streptavidin交互可以可逆地打破了使用水在升高的温度下。

电泳。2005年2月,26 (3):501 - 10。

PubMed ID

15690449 (在PubMed

]

文摘

biotin-streptavidin系统最强的共价生物交互,离解常数,K (d), 4 x10的顺序(-14)m的强度和特异性相互作用使得它是使用最广泛的亲和力对分子、免疫、细胞分析。然而,它曾被无法重用任何链霉亲和素固体支持,因为打破交互所需的条件与链霉亲和素生物素导致变性。在这里,我们表明,短潜伏期在非离子水溶液在70摄氏度以上的高温会有效地打破不变性的交互链霉亲和素四聚物。生物素和链霉亲和素分子离解后保持活跃,因此可以重复使用。再生的效率与链霉亲和素允许固体支持使用很多次,这里例证与链霉亲和素的多个重用珠子之前用于样品制备自动化DNA测序。结果表明,链霉亲和素再生可以介绍为改善现有方法和分析基于链霉亲和素系统以及新兴领域的固相的应用程序,如微流体和纳米技术。

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