克隆和表达人类淋巴毒素的mRNA源自人类T细胞杂种细胞。
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小林Y,宫本茂D, M, Obinata M,大泽生T
克隆和表达人类淋巴毒素的mRNA源自人类T细胞杂种细胞。
,1986年9月,100(3):727 - 33所示。
- PubMed ID
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3536896 (在PubMed]
- 文摘
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我们克隆人类淋巴毒素(LT) cDNA从cDNA文库准备从十四烷酸佛波醇酯(PMA)和反面模拟人类T细胞杂种细胞(AC5-8)细胞,互补的核苷酸序列在质粒插入,pLT13,决心并与外周血单核细胞衍生的LT cDNA LT基因。总共四个延伸,包含14个核苷酸,三个序列是不同的。包括一个碱基的差异变化从C到编码区。因为这种变化将导致氨基酸的改变位置26从刺到Asn,我们构造了一个大肠杆菌表达质粒(plt13tac6 - 8.2)和哺乳动物细胞表达质粒(pSV2-LT)为了证实pLT13包含人类中尉的编码序列两个质粒转染后被发现合成活性LT分子JM105和COS-1细胞,分别溶解性活动被发现是完全由反人类LT血清中和。使用插入突变和缺失突变体,我们检查C末端的作用域在LT活动。获得的结果充分表明,C末端的完整无缺不到10残留是LT所需的活动。