过氧化物酶病目标作为分析工具potein-protein活细胞的相互作用:cytokine-independent生存激酶(CISK)结合PDK-1 phosphorylation-dependent地体内。
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引用
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流行病学T, Slagsvold T Skjerpen CS Brech, Stenmark H, Olsnes年代
过氧化物酶病目标作为分析工具potein-protein活细胞的相互作用:cytokine-independent生存激酶(CISK)结合PDK-1 phosphorylation-dependent地体内。
J生物化学杂志。2004年2月6日,279 (6):4794 - 801。Epub 2003年11月6日。
- PubMed ID
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14604990 (在PubMed]
- 文摘
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目前检测蛋白质相互作用方法费力来实现或不适应的哺乳动物体外系统或方法。通过添加酶目标信号(PTS)到一个蛋白质,结合合作伙伴缺乏针对信号co-transported进过氧化物酶体“背负”时尚,用共焦和电子显微镜。大肠杆菌素E2的片段和它紧密交互免疫蛋白,ImmE2,胞质中表达。当任何一个包含分标签,蛋白质都是在过氧化物酶体硝唑。cytokine-independent生存激酶(CISK)包含一个分标签没有有效地针对过氧化物酶体,除非Phox同源性(PX)领域,附加endosomal膜的蛋白质,被删除。然而,PTS-tagged CISK和删除PX域能够直接3-phosphoinositide-dependent蛋白激酶1 (PDK-1)过氧化物酶体。这表明两种蛋白质在活体内进行交互。变异Ser486,磷酸化激活CISK,阿拉巴马州阻止了交互,这表明CISK和PDK-1 phosphorylation-dependent的方式进行交互。蛋白质相互作用的方法因此允许评估依赖转录后修饰特异性或依赖于细胞的生理状态。