PH值的作用域在调节体外自身磷酸化事件所需的基因重组催化活性。
文章的细节
-
引用
复制到剪贴板 -
高X,哈里斯TK
PH值的作用域在调节体外自身磷酸化事件所需的基因重组催化活性。
Bioorg化学。2006年8月,34(4):200 - 23所示。Epub 2006年6月15日。
- PubMed ID
-
16780920 (在PubMed]
- 文摘
-
除了催化领域,phosphoinsositide-dependent蛋白激酶1(基因)包含一个c端pleckstrin同源性(PH)领域,结合膜结合的磷脂酰肌醇(3、4、5)三磷酸(π(3、4、5)P3]第二信使。在这里,我们报告体外动力学,此处则映射,和寡聚化研究PH值的作用域在调节特定自身磷酸化事件,这是所需的基因催化活化。首先,“不活跃”磷酸化形式的n端His6标记完整(His6-PDK1)和催化域构造(His6-PDK1 PH值(δ)]是由治疗λ蛋白磷酸酶(λ页)。调整λPP-treated His6-PDK1 PH值(δ)催化活性需要激活循环ser - 241磷酸化,只发生在trans-addition“活跃”的基因的明显的双分子的速率常数(app) k1 (S241) = 374 + -29 / (1) (1)。相比之下,全长λPP-treated His6-PDK1催化ser - 241 cis-autophosphorylation(应用)的一阶速率常数明显k1 (S241) = (5.0 + / - -1.5) x 10(4)(1)但仍“不活跃”。调整λPP-treated他(6)的基因存在的催化活性发生只有当autophosphorylatedπ(3、4、5)P3包含囊泡。π(3、4、5)P3 PH值绑定到域激活明显一阶ser - 241自身磷酸化的20倍((app) k1 (S241) = (1.1 + / - -0.1) x 10(2)(1)),也促进了两相的刺- 513 trans-autophosphorylation [(app) k2 (T513) = (4.9 + / - -1.1) x 10 M(1)(2)(1)和(app) k3 (T513) = (1.5 + / - -0.2) x 10(3)米(1)(1)]。诱变研究的结果表明,用力推- 513磷酸化可能导致离解autoinhibitory联系人之间形成连续的监管PH值和催化激酶域。