测序的基因imipenem-cefoxitin-hydrolyzing酶(CfiA)从脆弱拟杆菌TAL2480显示强烈的相似性CfiA和蜡样芽胞杆菌beta-lactamase II。
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汤普森JS, Malamy MH
测序的基因imipenem-cefoxitin-hydrolyzing酶(CfiA)从脆弱拟杆菌TAL2480显示强烈的相似性CfiA和蜡样芽胞杆菌beta-lactamase II。
J Bacteriol。1990年5月,172 (5):2584 - 93。
- PubMed ID
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2110145 (在PubMed]
- 文摘
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使用新建fragilis-Escherichia多形拟杆菌克隆穿梭载体,pJST61,我们已经克隆了头孢西丁(福克斯)-imipenem (IMP)电阻行列式从b fragilis TAL2480。FOX-IMP电阻应变结果从生产的周质的,Zn2(+)包含beta-lactamase水解碳青霉烯和cephamycins,其活动对克拉维酸但敏感Zn2(+)结合试剂,包括EDTA。pJST61向量允许高效的图书馆建设在大肠杆菌和允许图书馆的转移到b fragilis收件人筛选或选择特定的表型。图书馆发现含有FOX-IMP抗性基因克隆后转移到b fragilis TM4000 Foxr (Fox-Imps)选择。一个隔离携带质粒pJST241耐福克斯和IMP和综合周质的蛋白质底物和抑制剂TAL2480属性相同的压力。删除的基础上分析,Tn1000插入突变,DNA测序,我们已经定义了747 -基地cfiA (FOX-IMP阻力)基因在3.6千碱基pJST241克隆插入。cfiA基因包含一个开放阅读框,编码249个氨基酸前体蛋白和分子量为27260道尔顿。一个潜在的信号序列已被确定在这种蛋白质的N末端;劈理在这个序列将导致一个231个氨基酸的蛋白分子量为25249道尔顿。CfiA蛋白质显示的出口有着惊人的相似之处,Zn2(+)要求,II型beta-lactamase Blm蛋白质从蜡样芽胞杆菌569 / H和5 / B / 6。 Although overall amino acid identity is only 32%, the Zn ligand-binding His and Cys residues are precisely conserved and the amino acids in the vicinity of these sites show strong similarities (greater than 80%) when the CfiA and Blm proteins are compared.