大肠杆菌天冬氨酸转氨酶的定点诱变:Tyr70在催化过程中的作用。
文章的细节
-
引用
复制到剪贴板 -
井上K, Kuramitsu年代,冈本,Hirotsu K, Higuchi T, Kagamiyama H
大肠杆菌天冬氨酸转氨酶的定点诱变:Tyr70在催化过程中的作用。
生物化学。1991年8月6日,30 (31):7796 - 801。
- PubMed ID
-
1868057 (在PubMed]
- 文摘
-
定点诱变活性部位的Tyr70大肠杆菌的天冬氨酸转氨酶(AspAT)其次是动力学研究阐明的角色的羟基与苯环Tyr70。x射线晶体分析表明,更换Tyr70通过板式换热器没有改变酶的活性部位构象。比较四个half-transamination反应的动力学参数(吡哆醛5 '磷酸形成的酶L-aspartate或L-glutamate和吡哆胺5 '磷酸形成oxalacetate或2-oxoglutarate)野生型和[Tyr70——板式换热器]AspATs表明突变增加了过渡态的能级2 kcal.mol-1四种基质,暗示一些贡献Tyr70羟基的过渡态。Phe70进一步Ser所取代时,过渡态的能级L-glutamate或2-oxoglutarate,但不是L-aspartate或oxalacetate,进一步增加了2 - 3 kcal.mol-1,表明苯环的存在位置70为底物识别L-glutamate-2-oxoglutarate对至关重要。