His143在大肠杆菌天冬氨酸转氨酶的催化机理。
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矢野T, Kuramitsu年代,没有试图推高日圆年代,森野Y, Hiromi K, Kagamiyama H
His143在大肠杆菌天冬氨酸转氨酶的催化机理。
生物化学杂志。1991年4月5日,266 (10):6079 - 85。
- PubMed ID
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2007566 (在PubMed]
- 文摘
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在天冬氨酸转氨酶(AspAT) His143坐落在一个氢键距离Asp222组成一个强大的环氮离子对辅酶,吡哆醛5 '磷酸(PLP)或吡哆胺5 '磷酸(PMP)。大肠杆菌的His143 AspAT取而代之的是阿拉巴马州或Asn。突变体酶H143A显示略有增加的最大速度整体2-oxoglutarate与天冬氨酸转氨作用反应,而H143N AspAT显示减少60%的最大速率总体反应在两个方向上。在所有的half-transamination四底物的反应,天冬氨酸,谷氨酸,oxalacetate、2-oxoglutarate,催化能力所定义的kmax / Kd减少3-18-fold由阿拉巴马州或取代His143 Asn。减少的程度不同的衬底;它在很大程度上减少导致的所有底物的亲和力。平衡常数,[PMP-form][酮酸]/ [(PLP-form][氨基酸]),降低了10倍的突变在143位置。H143A和H143N AspATs展出2-methylaspartate大大减少亲和力,external-aldimine-forming底物类似物,然而没有明显的改变在琥珀酸和戊二酸的亲和力,non-aldimine-forming类似物。这些发现表明,对于催化虽然His143不是至关重要的,它可能帮助es复杂的形成。