重新设计一种酶的底物特异性的突变累积效应稳定的残留。
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我们的年代,Okamoto,矢野T, Kagamiyama H
重新设计一种酶的底物特异性的突变累积效应稳定的残留。
J生物化学杂志。1999年1月22日,274 (4):2344 - 9。
- PubMed ID
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9891001 (在PubMed]
- 文摘
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定向进化是用来改变天冬氨酸转氨酶的底物特异性。与17个氨基酸替换突变酶生成显示2.1 x 10(6)倍增加催化效率(kcat /公里)非衬底,缬氨酸。吸收光谱的辅酶,吡哆醛5 '磷酸,也改变了明显的突变。有趣的是,只有一个17岁的残留物似乎能够接触衬底,并没有一个与辅酶。突变酶的三维结构与缬氨酸模拟混合时,摘要(2.4 a分辨率取决于x射线晶体学),揭示了突变影响衬底绑定。活性部位改造;子单元界面修改,包含底物的酶域转移的突变。目前的结果证明清楚残留的累积效应的重要性远离的活性部位和代表一个新行酶活动的设计方法。