理解的作用基本Asp251细胞色素p450cam使用定点诱变,溶剂结晶学和动力学同位素效应。
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Vidakovic M, Sligar SG,李H, Poulos TL
理解的作用基本Asp251细胞色素p450cam使用定点诱变,溶剂结晶学和动力学同位素效应。
生物化学,1998年6月30日,37 (26):9211 - 9。
- PubMed ID
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9649301 (在PubMed]
- 文摘
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质子转移在细胞色素P450酶是一个关键的步骤,分子氧的活化。P450cam活跃的网站的大量研究已经发现一些残留物,发挥核心作用在分子氧键断开。一个高度保守的羧酸盐,天冬氨酸- 251在远端螺旋P450cam我参与一系列/离子对形成氢键的分子表面附近,与催化机理。已知突变Asp251低活动2数量级改变病原反应一步催化循环,暗示作用酸功能一代iron-oxygen活性中间体。Asp251Asn突变体在不同的流动率protium-deuterium混合物已经确定,显示明显较大的动能溶剂同位素效应,整体大小10比野生型P450cam 1.8。此外,大量的质子参与的病原反应一步Asp251Asn比野生型酶突变体。这些结果表明,Asp251是正常的一个重要组成部分质子o - o键断开交付所需的机械。Aps251Asn突变体的晶体结构在低温下从收集的数据中获得1.9已经完善。关键氢键必须持有Asp251位置打破它允许突变Asn251侧链摆出和氧气结合位点导致一个更加开放的活性部位。这种变化可以被水更容易获得,因此导致观察到的动能溶剂同位素效应。