函数的His185 Aquifex aeolicus 3-deoxy-D-manno-octulosonate 8-phosphate合成酶。
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高管王J,杜维尔HS、Stuckey JA Woodard RW,•加蒂DL
函数的His185 Aquifex aeolicus 3-deoxy-D-manno-octulosonate 8-phosphate合成酶。
J杂志。2002年11月22日,324(2):205 - 14所示。
- PubMed ID
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12441100 (在PubMed]
- 文摘
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Aquifex aeolicus 3-deoxy-D-manno-octulosonate 8-phosphate合成酶(KDO8PS)催化缩合的树胶醛醣5-phosphate (A5P)和磷酸烯醇丙酮酸(PEP)的支持激活水分子活性部位金属离子协调。Cys11、His185 Glu222和Asp233是其他金属配体。野生型KDO8PS纯化与锌(2 +)或铁(2 +)的活性部位,但最大活动在体外实现内生金属取代Cd时(2 +)。H185G酶保留8%的野生型活动。电感耦合高频等离子质谱分析表明His185损失降低了酶的亲和力为Fe(2 +),但不是锌(2 +)。然而,最大活动再次通过替换内生金属与Cd (2 +)。我们已经确定Cd(2 +)的x射线结构H185G酶substrate-free形式,在复杂和PEP, PEP + A5P。这些结构显示正常数量的Cd(2 +)绑定,这表明协调由His185不是必要保留光盘(2 +)的活性部位。尽管如此,在协调领域有重大变化的Cd(2 +)对野生型酶,PEP的羧酸盐基直接结合到金属离子和配体取代水和His185。这些观察表明,His185的主要功能。aeolicus KDO8PS is to orient PEP in the active site of the enzyme in such a way that a water molecule on the sinister (si) side of PEP can be activated by direct coordination to the metal ion.