识别潜在的活性位点残基在大肠杆菌肽酶。
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唱,Dalbey再保险
识别潜在的活性位点残基在大肠杆菌肽酶。
生物化学杂志。1992年7月5日,267 (19):13154 - 9。
- PubMed ID
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1618816 (在PubMed]
- 文摘
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领袖肽酶的大肠杆菌裂解领袖从膜和分泌蛋白质的氨基酸序列后,这些蛋白质跨膜插入。尽管大量的研究,但领袖肽酶的催化机理仍然未知。这种肽酶不能分类使用丝氨酸蛋白酶抑制剂,半胱氨酸天冬氨酸,或金属-类蛋白酶(Zwizinski C。、日期、T。,Wickner w(1981)生物。256年化学,3593 - 3597)。使用定点诱变,我们试图地方领导人肽酶在这些团体之一。我们发现,领袖肽酶缺乏所有的半胱氨酸残基,可以从procoat叫前导肽,噬菌体M13外壳蛋白的前体。更换与每一个组氨酸残基丙氨酰残没有对催化的影响。在所有丝氨酸和天冬氨酸残基,90年丝氨酸和185年丝氨酸和天冬氨酸99年,153年,273年和276年是必要的分裂procoat洗涤剂提取。然而,只有丝氨酸90和天冬氨酸153被要求使用一个高度敏感的体内分析进行处理。 In addition to the residues directly affecting catalysis, aspartic acid 99 plays a role in maintaining the structure of leader peptidase. Replacement of this residue with alanine results in a very unstable leader peptidase protein. This study thus defines two critical residues, serine 90 and aspartic acid 153, that may be directly involved in catalysis and provides evidence that leader peptidase belongs to a novel class of serine proteases.