识别glu - 330催化亲核试剂的白色念珠菌exo-beta -(1,3)葡聚糖酶。
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Mackenzie低频、布鲁克GS Cutfield摩根富林明,沙利文PA,威瑟斯SG
识别glu - 330催化亲核试剂的白色念珠菌exo-beta -(1,3)葡聚糖酶。
J生物化学杂志。1997年2月7日,272 (6):3161 - 7。
- PubMed ID
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9013549 (在PubMed]
- 文摘
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exo-beta——从白色念珠菌(1、3)葡聚糖酶水解细胞壁葡聚糖通过一个双作用机制涉及糖基酶中间。反应的酶2 ',4 ' -dinitrophenyl-2-deoxy-2-fluoro-beta-D-glucopyranoside导致时间失活的酶通过积累的2-deoxy-2-fluoro-glycosyl-enzyme中间用电喷雾质谱监测也。这中间的催化能力由其复活证明通过水解(kreact = 0.0019最低为1)和转糖基作用,苄thio-beta-D-glucopyranoside (kreact = 0.024最低为1;Kreact = 56毫米)。标记酶的消化器官消化之后,串联质谱分析在中性损失模式允许检测两种糖化活性部位肽,它的序列被确定为NVAGEW和NVAGEWSAA。glu - 330的关键作用是证实了定点诱变在这个网站和合成突变体的动力学分析。glu - 330的活动- - > Gln变异减少超过50000倍比野生型酶。谷氨酸,确定在exoglucanase glu - 330,是完全守恒这个家庭的酶催化亲核试剂,特此确认。