特定场地的大肠杆菌诱变天冬酰胺酶II。没有需要三个组氨酸残基的催化。
文章的细节
-
引用
复制到剪贴板 -
比切姆韦娜,危害E,詹宁斯议员,IR, Derst C,韧皮P,罗门哈斯KH
特定场地的大肠杆菌诱变天冬酰胺酶II。没有需要三个组氨酸残基的催化。
欧元。1992年9月1日,208 (2):475 - 80。
- PubMed ID
-
1521538 (在PubMed]
- 文摘
-
位点突变被用来取代三个组氨酸残基的大肠杆菌与其他氨基酸天冬酰胺酶II (EcA2)。以下酶变异进行了研究:[H87A] EcA2 H87L EcA2, H87K EcA2, H183L EcA2和H197L EcA2。没有突变显著影响公里为天门冬氨酸beta-hydroxamate或受损的天冬氨酸绑定。相对活动向L-Asn L-Gln,天门冬氨酸beta-hydroxamate减少程度不尽相同,与剩余活动超过10%的野生型价值观。这些数据不支持先前的报道表明组氨酸残基的催化作用是必不可少的。修改后的酶的光谱特性允许组氨酸的明确分配1 h - nmr光谱共振的天冬酰胺酶II。以前一个组氨酸的信号显示在天冬氨酸绑定将His183消失,不是高度保守的His87。这一事实[H183L] EcA2正常活动,但大大降低尿素的存在表明,稳定His183对本机天冬酰胺酶的稳定很重要四聚物。1 h - nmr、荧光光谱表明His87位于蛋白质的内部,可能附近活跃的站点。