一个结合胆汁酸水解酶基因的克隆和表征perfringens梭状芽胞杆菌。
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科尔曼JP,哈德逊
一个结合胆汁酸水解酶基因的克隆和表征perfringens梭状芽胞杆菌。
:环境Microbiol。1995年7月,61 (7):2514 - 20。
- PubMed ID
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7618863 (在PubMed]
- 文摘
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基因编码一个结合胆汁酸水解酶(CBAH)梭状芽胞杆菌perfringens 13个克隆和表达的大肠杆菌,和它的核苷酸序列被确定。核苷酸和氨基酸序列预测分析表明,基因产物与两个以前描述的酰胺酶,从乳杆菌CBAH身份(40%)和青霉素V酰胺酶芽孢杆菌sphaericus身份(34%)。从c产品显然无关CBAH perfringens决心的n端序列信息。基因产物的纯化重组大肠杆菌和用于提高抗体的兔子。蛋白质的存在c perfringens随后证实了免疫印迹分析。蛋白质被证明有一个本地的分子量亚基分子量147000和36100,表明其可能存在四聚物。中断的染色体c perfringens CBAH与氯霉素抗性基因盒导致突变株,保留部分CBAH活动。聚丙烯酰胺凝胶电泳酶活性染色和免疫印迹表明突变株不再表达克隆CBAH (CBAH-1)但至少表达了一个额外的CBAH (CBAH-2)。CBAH-2免疫CBAH-1不同,其流动性原生聚丙烯酰胺凝胶是CBAH-1的不同。此外,pH值比较的最适条件和底物特异性CBAH活动重组大肠杆菌野生型和突变体c perfringens提供进一步证据的存在多个在c . perfringens CBAH活动。