生物合成硫解酶的菌胶团ramigera。证据的机制包括半胱氨酸- 378活性部位的基础。
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帕默,Differding E, Gamboni R,威廉姆斯科幻,人民OP,沃尔什CT, Sinskey AJ, Masamune年代
生物合成硫解酶的菌胶团ramigera。证据的机制包括半胱氨酸- 378活性部位的基础。
生物化学杂志。1991年5月5日,266 (13):8369 - 75。
- PubMed ID
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1673680 (在PubMed]
- 文摘
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生物合成硫解酶的菌胶团ramigera是灭活机理钝化剂,3-pentynoyl-S-pantetheine-11-pivalate (3-pentynoyl-SPP) K1 = 1.25毫米和kinact = 0.26最低为1,2,3-pentadienoyl-SPP获得非酶的重排的3-pentynoyl-SPP K1 = 1.54毫米和kinact = 1.9最低为1和一个亲和标记试剂,acryl-SPP。获得的结果与alkynoyl allenoyl钝化剂从z . ramigera作为证据表明硫解酶能够催化质子抽象分道扬镳碳碳键的形成。灭活剂,3-pentynoyl-SPP亲和标记试剂,acryl-SPP,陷阱一样的活性部位半胱氨酸残基,半胱氨酸- 378。评估如果半胱氨酸- 378是去质子化的活性部位残留第二分子的乙酰辅酶a、g - 378突变体酶进行了研究。硫解方向的g - 378突变体是超过50000倍比野生型和慢100000倍慢凝结的方向。然而,突变体酶仍能够形成acetyl-enzyme中间和0.81合并等价物14 c-label与[14 c] Ac-CoA孵化后60分钟。32 p-label的可逆的交换(32 p) CoASH Ac-CoA, g - 378突变体酶,催化的进展与Vmax(交换)8000倍低于野生型酶但至少10倍的速度比整个缩合反应。这些数据提供的证据表明,半胱氨酸- 378是活跃的站点的基础。