化学改性的adenylosuccinate从大肠杆菌吡哆醛的5 '磷酸合成酶。一个活跃的站点lysyl残渣的识别。
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董问,弗洛姆HJ
化学改性的adenylosuccinate从大肠杆菌吡哆醛的5 '磷酸合成酶。一个活跃的站点lysyl残渣的识别。
J生物化学杂志。1990年4月15日,265 (11):6235 - 40。
- PubMed ID
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2108156 (在PubMed]
- 文摘
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孵化adenylosuccinate合成酶的大肠杆菌吡哆醛浓度较低的5 '磷酸(PLP)导致迅速丧失活动(92%),同时形成席夫碱。酶的失活PLP显然是一阶PLP。准一阶速率常数,卡普,显示出双曲依赖PLP的浓度,表明一个活动重要的PLP。酶失活过程中中间形成。化学计量学和肽隔离研究显示,2赖氨酸残基反应的酶PLP期间被修改。三种基质的adenylosuccinate合成酶(三磷酸鸟苷,小鬼,和天冬氨酸)显示不同的效果的能力对PLP保护酶失活。完整的保护对失活的酶可以观察到只有在高浓度的三磷酸鸟苷的存在。一个赖氨酸残基是在这些条件下的保护。三磷酸鸟苷相比,添加另外两个基板单独或共同反应混合物没有渲染的保护。肽图用胰蛋白酶消化酵素透露,三磷酸鸟苷是Lys140赖氨酸屏蔽。替换的Lys140 Ile140定点诱变导致全损的活动。 These results suggest that Lys140 may play an important role in enzymatic activity.