活性部位映射和甘氨酰胺核苷酸位点突变transformylase从大肠杆菌。
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史密斯Inglese J, JM, Benkovic SJ
活性部位映射和甘氨酰胺核苷酸位点突变transformylase从大肠杆菌。
生物化学。1990年7月17日,29 (28):6678 - 87。
- PubMed ID
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2204419 (在PubMed]
- 文摘
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亲和试剂N10 -(溴乙酰)5,8-dideazafolate曾被证明灭活甘氨酰胺核苷酸transformylase (EC 2.1.2.2)从大肠杆菌active-site-directed地1:1化学计量学(Inglese et al。(1990)生物化学29岁,1436 - 1443]。经过一系列的蛋白水解一点温和,dideazafolate标签本地化的活性部位肽连接一个酯键的高度保守的残渣Asp 144。随后的144位点突变的Asp Asn 144导致催化地不活跃的酶,保留了底物和抑制剂结合的能力。Asn 144突变体可以进一步标记亲和试剂active-site-directed化学计量的方式;然而,该网站的修改在本例中是他的119年。这些结果暗示Asp 144可能函数一般基地内的催化中心transformylase,接近119年的折叠的蛋白质。