克隆技术、DNA序列分析和表达的大肠杆菌基因mandelate消旋酶从假单胞菌putida。
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赎金SC, Gerlt是的,权力VM,肯扬GL
克隆技术、DNA序列分析和表达的大肠杆菌基因mandelate消旋酶从假单胞菌putida。
生物化学。1988年1月26日,27 (2):540 - 5。
- PubMed ID
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2831968 (在PubMed]
- 文摘
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的基因mandelate消旋酶(EC 5.1.2.2)从假单胞菌putida(写明ATCC 12633)是克隆在铜绿假单胞菌(写明ATCC 15692)。克隆基因的选择是基于铜绿假单胞菌生长的能力(R) -mandelate作为唯一碳源的缺乏mandelate消旋酶mandelate通路。p . putida DNA片段的染色体DNA通过消化Sau3A被绑定到BamHI革兰氏阴性的矢量pKT230和转化为铜绿假单胞菌宿主。转化株能利用(R) -mandelate作为唯一碳源的特点,和质粒被发现含有大约5千碱基双p putida DNA。Subcloning DNA显示位置的内消旋酶的基因克隆的DNA putida页。dideoxy-DNA测序过程被用来确定序列的基因序列及其翻译。的氨基酸序列和分子量mandelate消旋酶的推断基因序列(38 570)是在良好的协议与氨基酸组成和分子量多肽最近数据确定酶p . putida隔绝;最近决定多肽分子量显著差异的最初报道的价值69500(费用,朱迪思。国民生产总值,Hegeman&肯扬,基准线(1974)生物化学13,2528),用来证明alpha-phenylglycidate,一个活跃的站点不可逆抑制剂,与酶结合化学计量学的1:1。(抽象截断在250字)