Chorismate裂合酶:动力学和工程稳定性。
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霍尔顿MJ,梅休MP,加拉格尔DT, Vilker六世
Chorismate裂合酶:动力学和工程稳定性。
Biochim Biophys学报。2002年1月31日,1594 (1):160 - 7。
- PubMed ID
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11825618 (在PubMed]
- 文摘
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通过移除enolpyruvyl集团从chorismate chorismate裂合酶(CL)产生p-hydroxybenzoate (p-HB)泛醌生物合成途径。我们分析了CL由几个光谱和化学技术和测量其动能(kcat = 1.7 (1)、K (m) = 29 microM)和产物抑制参数(K (p) = 2.1 microM p-HB)。与野生型CL蛋白聚合,一个严重的问题,主要是由于两个表面活性的半胱氨酸的存在,其化学改性或突变(丝氨酸)给大大提高解决方案的行为和次要对酶活性的影响。通过其产品p-HB CL强烈抑制;为此活动和抑制测量分析了初始速率和进步曲线的方法。结果是一致的,但在这种情况下,稳定enzyme-product复杂迅速成为主要形式的酶,进程曲线方法更有效。我们也报告一些底物和产物类似物的抑制测量,提供信息结合配体相互作用的活性部位。不寻常的生物功能产品保留仍不确定,但可能需要一个机制的指示交付后的膜结合酶辅酶q通路中的CL。