结构和功能的突变Arg44Lys 4-hydroxybenzoate羟化酶影响NADPH绑定。
文章的细节
-
引用
复制到剪贴板 -
Eppink MH, Schreuder哈,效力过WJ
结构和功能的突变Arg44Lys 4-hydroxybenzoate羟化酶影响NADPH绑定。
欧元。1995 7月1日,231 (1):157 - 65。
- PubMed ID
-
7628466 (在PubMed]
- 文摘
-
Arg44,位于si-face 4-hydroxybenzoate黄素环的羟化酶,是由特定站点更改为赖氨酸诱变。晶体的[R44K] 4-hydroxybenzoate羟化酶包裹着4-hydroxybenzoate衍射到0.22纳米的分辨率。[R44K] 4-hydroxybenzoate羟化酶的结构与野生型相同酶除了本地更改附近的突变。肽单位Ile43和Lys44之间翻了180度50%的分子。beplayappφ,ψ角在本机和翻转构象都允许以外的地区和表明紧张的构象。[R44K] 4-Hydroxybenzoate羟化酶的亲和力下降黄素辅基。这是归因于失去Arg44的侧链之间的相互作用和diphosphoribose时尚的一部分。更换Arg44赖氨酸不变化的位置黄素戒指它占据了野生型的室内位置一样。[R44K] 4-Hydroxybenzoate羟化酶完全夫妇黄素减少衬底羟基化。Stopped-flow动力学表明,4-hydroxybenzoate的效应作用在很大程度上是守恒的突变。 Replacement of Arg44 by Lys however affects NADPH binding, resulting in a low yield of the charge-transfer species between reduced flavin and NADP+. It is inferred from these data that Arg44 is indispensable for optimal catalysis.