Lys42和Ser42变体p-hydroxybenzoate羟化酶的荧光假显示Arg42 NADPH绑定至关重要。
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Eppink MH, Schreuder哈,效力过WJ
Lys42和Ser42变体p-hydroxybenzoate羟化酶的荧光假显示Arg42 NADPH绑定至关重要。
4月1。1998欧元;253 (1):194 - 201。
- PubMed ID
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9578477 (在PubMed]
- 文摘
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黄素蛋白的保守Arg42 p-hydroxybenzoate羟化酶活性部位的入口处坐落一个循环螺旋H2和表之间的E1 FAD-binding域。更换Arg42赖氨酸或Ser降低了流动率p-hydroxybenzoate羟化酶的荧光假两个数量级以上。快速反应动力学表明,低活性的Arg42变异的结果绑定NADPH受损。与早期的结论为不动杆菌calcoaceticus p-hydroxybenzoate羟化酶,替换与Ser42 Arg42从p .荧光酶几乎扰乱时尚的绑定。晶体的[Lys42] p-hydroxybenzoate羟化酶包裹着4-hydroxybenzoate衍射到0.22纳米的分辨率。Lys42的结构变体几乎与本机与黄素酶环占据室内活性部位中的位置。Lys42突变结构的相互作用间接地通过一个溶剂分子的3-OH腺苷核糖时尚的一部分。衬底扰动不同光谱表明Arg42替代品影响黄素环的溶剂可及性氧化的酶。尽管如此,Arg42变体完全夫妇衬底羟基化酶减少。顺序比较研究表明,Arg42参与绑定2的-phosphoadenosine NADPH的一部分。