氨肽酶P基因的测序和高表达于大肠杆菌HB101。
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Yoshimoto T,语气H,本田T, Osatomi K,小林R,鹤D
氨肽酶P基因的测序和高表达于大肠杆菌HB101。
,1989年3月,105 (3):412 - 6。
- PubMed ID
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2659585 (在PubMed]
- 文摘
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一个质粒pAPP1 4 kbp插入pBR322 PstI站点的编码氨基肽酶P基因的大肠杆菌HB101 (Yoshimoto et al。(1988) j。104, 730 - 734),是subcloned pUC18和pUC19。大肠杆菌的转化株JM83窝藏pAPP4 1.9 kbp片段显示超过50倍的酶活性高于主机,在37摄氏度培养后40 h LB-medium含有氨苄青霉素。pAPP4相反的基因DNA插入时,酶的生产力明显下降。整个核苷酸序列插入片段的质粒pAPP4被双脱氧链终止法澄清。在这个序列中,成熟的酶的编码蛋白的序列被发现后开始ATG密码子,根据与伴蛋白质测序。11个基地的上游提出起始密码子是一个AGGAGA似乎是核糖体结合位点序列。34上游基地从提出开始密码子是6-base序列TACAAA,所谓-10地区或普里布诺框。此外,6-base序列TTTACT上游约77基地从一开始推导了密码子是一个假定的-35地区共有序列。反向重复在1334年初步认为是一个终结者。酶的分子量核苷酸序列的估计是49650。 The purified enzyme contained 0.2 gram atom of zinc per subunit. The enzyme activity was inhibited by EDTA and activated 5-fold by Mn2+.