综合定点诱变L-2-halo酸dehalogenase探查催化氨基酸残基。
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栗原市T,刘金桥,Nardi-Dei V, Koshikawa H,江崎N, K苏打水
综合定点诱变L-2-halo酸dehalogenase探查催化氨基酸残基。
,1995年6月,117(6):1317 - 22所示。
- PubMed ID
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7490277 (在PubMed]
- 文摘
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L-2-Halo dehalogenase酸催化的立体定向水解脱卤作用L-2-Halo酸,C2-configuration反转。七L-2-halo酸dehalogenases不同菌株明显相似的氨基酸序列(36 - 70%的身份),他们应该催化反应通过相同的机制。识别催化地重要的残留,我们突变36个高度保守的带电极性氨基酸残基的L-2-halo酸从假单胞菌sp dehalogenase。YL、由232个氨基酸残基,通过更换D N, E的Q, R K,反之亦然,S和T的,Y和W F,由L, M和H N .我们发现更换D10 K151, S175, D180, R41, S118, T14, Y157,和N177导致重大损失在酶活性或衬底的Km值的增加,显示他们的参与催化。这些残留的作用进行了讨论。