纯化和结构3-methyladenine-DNA糖基化酶的大肠杆菌。
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山本Sakumi K, Nakabeppu Y, Y,川端康成,Iwanaga年代,Sekiguchi M
纯化和结构3-methyladenine-DNA糖基化酶的大肠杆菌。
J生物化学杂志。1986年11月25日,261 (33):15761 - 6。
- PubMed ID
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3536912 (在PubMed]
- 文摘
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我们建造了一个重组质粒携带突变基因抑制标记。过度生产其基因产物,0.8千碱基的DNA片段携带该基因被pUC8 lac启动子的控制下。3-Methyladenine-DNA糖基化酶活性等细胞携带质粒(pCY5) 450倍高于野生型菌株,在接触isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside。从这些细胞的提取,酶纯化明显物理同质性、氨基酸组成和伴酶的氨基酸序列测定。数据符合基因的核苷酸序列,由双脱氧方法。这是推断3-methyladenine-DNA糖基化酶我由187个氨基酸组成及其分子量是21100,符合钠十二烷基的价值估计sulfate-polyacrylamide纯化蛋白的凝胶电泳。只有3-methyladenine切除从甲基化DNA糖基化酶的纯化。这些结果表明,结构基因的标记3-methyladenine-DNA糖基化酶。