本地化的II型dehydroquinases的活性部位。识别常见的两类dehydroquinases arginine-containing图案。
文章的细节
-
引用
复制到剪贴板 -
科瑞尔T, Horsburgh MJ,库珀,凯利SM,考金斯JR .
本地化的II型dehydroquinases的活性部位。识别常见的两类dehydroquinases arginine-containing图案。
271年J生物化学杂志。1996年10月4日,(40):24492 - 7。
- PubMed ID
-
8798709 (在PubMed]
- 文摘
-
一个新颖的方法基于电喷雾质谱(Krell, T。皮特,a。R。考金斯,j . r .(1995年)2月。360年,93 - 96)被用来定位活性部位在I型和II型dehydroquinases残留。酶都有必要hyper-reactive精氨酸残基,II型酶有重要的酪氨酸残基。链霉菌属的基本hyper-reactive Arg-23 coelicolor II型酶已经取代了赖氨酸,谷氨酰胺和丙氨酸残基。所表现出的突变酶纯化和CD谱结构类似于野生型酶。所有三个突变体酶不活跃得多,例如kcat R23A突变体的30000倍减少。公里值的突变体都有下降,说明加强衬底绑定,这证实了等温滴定量热学实验。的角色Arg-23稳定的负碳离子中间。周围的氨基酸序列比较hyper-reactive精氨酸残基的两类酶表明有一种守恒的结构性主题,可能反映了常见的底物结合褶皱这两类酶的活性中心。