第一步:基因治疗结直肠癌患者的发展克隆、测序,大肠杆菌胞嘧啶脱氨酶的表达。
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奥斯汀EA,休伯
第一步:基因治疗结直肠癌患者的发展克隆、测序,大肠杆菌胞嘧啶脱氨酶的表达。
摩尔杂志。1993年3月,43 (3):380 - 7。
- PubMed ID
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8450832 (在PubMed]
- 文摘
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我们已经开发出一种新方法包括基因疗法治疗原发性和转移性肿瘤在肝。作为第一步的发展,基因疗法治疗转移性结直肠癌患者的大肠杆菌基因编码胞嘧啶脱氨酶(CD) (EC 3.5.4.1)已被克隆。通过使用积极的基因选择,质粒携带10.8千碱基BamHI / EcoRI DNA插入CD酶活性被隔离。遗传筛查,紧随其后的是酶化验,确定了3-kilobase DNA片段,保留CD活动。胞嘧啶脱氨基作用和5-fluorocytosine (5-FC)克隆CD了。DNA和蛋白质测序确定427氨基酸的开放阅读框编码CD。证明在真核细胞表达CD允许无毒前体药物的代谢5-FC有毒代谢物5 -氟尿嘧啶,CD是克隆到真核表达载体,转染人类结直肠癌细胞系。生长抑制的研究显示转变的IC50 5-FC从17000 microM父母30 microM细胞细胞系表达CD。