动力学和金黄色葡萄球菌的活性部位动态砷酸还原酶。
文章的细节
-
引用
复制到剪贴板 -
Messens J,马丁斯JC,布洛E,范美女K,雅各布斯DM,威廉R, wyn L
动力学和金黄色葡萄球菌的活性部位动态砷酸还原酶。
J Inorg化学杂志。2002年1月;7 (1 - 2):146 - 56。Epub 2001年7月24日。
- PubMed ID
-
11862551 (在PubMed]
- 文摘
-
砷酸还原酶(ArsC)由金黄色葡萄球菌arsenic-resistance质粒编码pI258减少细胞内砷酸亚砷酸(V)更多的有毒(III),随后从细胞挤压。硫氧还蛋白的夫妇,硫氧还蛋白还原酶和NADPH保持酶的活性。ArsC极其敏感氧化失活,有一个非常动态的性格阻碍共振作业在NMR和产生特殊的两相的Michaelis-Menten曲线有两个V (max)高原。在这项研究中,方法控制ArsC氧化在净化优化。接下来,应用塞尔温酶失活的测试是应用于进度曲线和显示的四面体oxyanions (50 mM硫酸盐、磷酸盐或高氯酸盐)的控制允许ArsC Michaelis-Menten的稳定,基本上消除了两相的特征曲线。最后,1 h-15n HSQC NMR光谱被用来建立这些oxyanions,砷酸包括衬底,发挥他们的稳定影响ArsC通过绑定残留位于C-X5-R序列基序,特点为phosphotyrosine磷酸酶。针对这种需要四面体oxyanion结构其活性构象的底物结合位点,ArsC的基本动力学参数的重新评价是必要的。在这些新条件下,相比以前的观测,ArsC底物特异性高,因为只有砷酸可以减少(公里= 68 microM, k (cat) /公里= 5.2 x 10 (4) M-1s-1),虽然其产品,亚砷酸盐,被确认为一个混合抑制剂(k * iu = 534 microM k * ic = 377 microM)。