Y299C突变体的结构分析大肠杆菌UDP-galactose 4-epimerase。教老狗学新把戏。
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Thoden JB,亨德森JM Fridovich-Keil杰,霍尔顿嗯
Y299C突变体的结构分析大肠杆菌UDP-galactose 4-epimerase。教老狗学新把戏。
J生物化学杂志。2002年7月26日,277 (30):27528 - 34。2002年5月17日Epub。
- PubMed ID
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12019271 (在PubMed]
- 文摘
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UDP-galactose 4-epimerase催化UDP-Gal互变现象和UDP-Glc在正常半乳糖代谢。哺乳动物的酶,大肠杆菌的方法不同,它还可以互换UDP-GalNAc UDP-GlcNAc。差向异构酶反应机理的一个关键特性是旋转4-ketopyranose中间的活性部位。通过比较的高分辨率x射线结构这两个酶的细菌和人类的形式,这是先前假定人类差向异构酶是由于额外的活动替代结构等效的大肠杆菌酶酪氨酸- 299的半胱氨酸残基,从而导致一个更大的活性部位。测试这个假说,Y299C大肠杆菌的突变体酶制备及其三维结构解决了这里所描述的那样。此外,Y299C突变蛋白是活动UDP-Gal和UDP-GalNAc化验。这些研究显示,事实上,这个简单的突变并赋予UDP-GalNAc / UDP-GlcNAc转换活动与最小的细菌酶其三维结构的变化。具体来说,尽管Y299C细菌酶的突变导致的损失差向异构酶活动关于UDP-Gal近5倍,它导致了增加活动对UDP-GalNAc超过230倍。