rhodanese基因的克隆、序列分析和超表达的固氮菌vinelandii。
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科尔纳吉画廊R,帕加尼,肯尼迪C,德拉蒙德
rhodanese基因的克隆、序列分析和超表达的固氮菌vinelandii。
欧元。1996 2月15日,236 (1):240 - 8。
- PubMed ID
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8617271 (在PubMed]
- 文摘
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克隆一个基因编码rhodanese (rhdA)是来自固氮菌vinelandii 2.3 kb SphI片段。这个片段被其杂交和PCR扩增获得的产品使用简并引物的基因组DNA编码的氨基端序列从a . vinelandii rhodanese纯化。序列813 - bp 1.2 kb区域显示一个开放阅读框,编码271个氨基酸的多肽,氨基端序列是相同的a . vinelandii rhodanese。在搜索的数据库条目,真核rhodaneses和rhodanese-like蛋白质从细菌给身份(27 - 30%)的最高分数的预测产品813 - bp开放阅读框。a . vinelandii RhdA显示更少的序列相似性脊椎动物rhodaneses比原核rhodanese-like蛋白质并没有显示出典型的rhodanese活动。基本残留物被认为是催化地重要牛rhodanese并不守恒a vinelandii rhodanese。序列相似性的两个结构相似的域名rhodanese更明显的比牛vinelandii酶酶,并支持的假设生成的完整结构最初基因重复。当rhdA在大肠杆菌中,rhodanese代表细胞蛋白总量的30%,硫代硫酸盐:氰化物sulfurtransferase颗粒提取物的活动> 600倍增加。a . vinelandii rhdA插入/删除突变体没有明显的表型与野生型菌株对不同生长在不同硫源或固氮酶活性。突变体保留20%的野生型rhodanese硫代硫酸盐:氰化物sulfurtransferase活动建议的存在冗余sulfurtransferase酶a vinelandii。