底物的识别机制prolyl氨基肽酶从粘质沙雷氏菌。
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井上Ito K, T, Kabashima T,加拿大N,黄HS,马X,阿N, Azab E, Yoshimoto T
底物的识别机制prolyl氨基肽酶从粘质沙雷氏菌。
2000年10月,128 (4):673 - 8。
- PubMed ID
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11011150 (在PubMed]
- 文摘
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基因的分子克隆的晶体结构prolyl氨基肽酶(EC 3.4.11.5)从粘质沙雷氏菌已经被我们研究[J。,122年,601 - 605 (1997);如上。126年,559 - 565 (1999)]。Tyr149,通过这些研究,Phe139 Glu204, Arg136估计与底物识别有关。阐明基质特异性的机制的细节,定点诱变方法应用。F139A突变体显示一个80倍的减少催化效率(k (cat) / k (m)),但Y149A突变没有显示显著改变催化效率。的催化效率E204Q突变是野生型的4%左右。beplayapp突变(R136A)的肽酶活性明显下降,然而,arylamidase活动Pyr-bNA wild-enzyme被保留。从这些结果,是澄清的氨基吡咯烷环和脯氨酸在S1站点被Phe139 Glu204,分别。P1的衬底被Arg136认可。 On the other hand, the enzyme had two cysteine residues. Mutants C74A and C271A were inhibited by PCMB, but the double mutated enzyme (C74/271A) was resistant to it.