核苷酸序列的hemB大肠杆菌K12基因。
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引用
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Echelard Y, Dymetryszyn J, Drolet M, Sasarman
核苷酸序列的hemB大肠杆菌K12基因。
摩尔创麝猫。1988年11月,214 (3):503 - 8。
- PubMed ID
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2464127 (在PubMed]
- 文摘
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大肠杆菌K12 hemB基因,编码胆色素原合成酶(PBG-S;syn 5-aminolevulinic酸脱水酶,ALA-D)克隆后插入EcoRI片段的质粒pCR1 F ' 13到可动员的向量。混合质粒携带hemB基因能够补充大肠杆菌K12的hemB突变:不仅是突变的PBG-S活动恢复后的收购hemB基因,但它是大约十倍的野生型。beplayappSubcloning原始EcoRI片段(14.6 kb)使我们找到hemB基因NruI-HpaI片段的约1.1 kb。beplayapphemB子位于朝NruI片段,使用如图所示的pKO promoter-probe一系列向量。hemB基因的测序表明存在一个开放阅读框(ORF) 1051个核苷酸,应该对应hemB蛋白质。引物延伸实验使我们能够识别5 ' hemB信使rna,并推导出-10和-35的hemB启动子区域。蛋白质合成由一个体外transcription-translation耦合系统,显示蛋白质约35 kDa的存在。beplayapp这是在协议与HemB蛋白质的分子量(35.6 kDa),推断该基因的核苷酸序列。大肠杆菌的氨基酸序列比较和人类PBG-S允许检测的几个地区强劲的两种蛋白质之间的同源性。 Two of these regions correspond, as expected, to the putative zinc-binding and catalytic sites of the human PBG-S.