纯化和表征5-aminolaevulinic酸脱水酶的大肠杆菌和metal-binding硫醇反应的研究领域。
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斯宾塞P,乔丹点
纯化和表征5-aminolaevulinic酸脱水酶的大肠杆菌和metal-binding硫醇反应的研究领域。
j . 1993 2月15日,290 (Pt (1): 279 - 87。
- PubMed ID
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8439296 (在PubMed]
- 文摘
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5-Aminolaevulinic酸脱水酶(ALAD)的重组菌株大肠杆菌是同质性的纯化。酶是一种亚基米homo-octamer (r) 36554 + / - 17所示。酶活性依赖于Zn2 +离子的存在和外生硫醇。两摩尔当量Zn2 +绑定/摩尔减少条件下的亚基。在接触金属螯合剂EDTA,两个Zn2 +离子去除,给一个不活动的metal-depleted apo-ALAD。holo-ALAD氧化,两个二硫化物键形成的损失1摩尔Zn2 + /摩尔的亚基。第一个二硫化物的形成导致催化活性的丧失。更换两个绑定Zn2 +离子与二氧化碳+导致绿色蛋白质的形成与光谱表明电荷转移乐队的出现从一个或多个cysteine-Co2 +配体。虽然Mg2 +不能激活apo-ALAD孤独,它能够代替第二磨牙相当于Zn2 +,导致进一步4倍刺激活动。四个半胱氨酸残基参与两个二硫化物键的形成是由蛋白质化学研究和确定都坐落在一个地区的蛋白质从氨基酸残基120 - 134。 Protein sequence data obtained in the present study has permitted the resolution of several differences between the published gene-derived protein sequences for ALAD from E. coli.