突变分析的核苷酶参与群体感应autoinducer-2生物合成。
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李我,黄陈德良W, DJ,康奈尔KA Riscoe MK,豪厄尔PL
突变分析的核苷酶参与群体感应autoinducer-2生物合成。
生物化学。2005年8月23日,44 (33):11049 - 57。
- PubMed ID
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16101288 (在PubMed]
- 文摘
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5 ' -Methylthioadenosine / S-adenosylhomocysteine核苷酶(MTAN)是重要的细胞功能,如聚胺生物合成,蛋氨酸打捞,生物甲基化和群体感应。核苷酶存在于许多细菌,但不是在哺乳动物系统中,从而使MTAN广谱抗菌药物的目标。衬底绑定和催化残基被确定晶体结构的MTAN包裹着5 ' -methylthiotubercidin[李,j·E。,康奈尔,k。Riscoe m k和豪厄尔,p . l .(2003)生物。化学,278 (10)8761 - 8770]。角色的活性位点残基Met9、Glu12 Ile50, Ser76, Val102, Phe105, Tyr107, Phe151, Met173, Glu174, Arg193, Ser196, Asp197, Phe207调查定点诱变和稳态动力学。诱变的残留Glu12、Glu174 Asp197完全取消活动。Asp197的位置和Glu12活性部位是一致的与他们在酶催化有直接的作用。Glu174建议参与催化的稳定过渡态正电荷O3 C2, C3和极化的原子和3 '羟基援助的电子流电子撤回嘌呤碱。这是第一个迹象的重要性3 '羟基的过渡状态的稳定。 Furthermore, mutation of Arg193 to alanine shows that the nucleophilic water is able to direct its attack without assistance from the enzyme. This mutagenesis study has allowed a reevaluation of the catalytic mechanism.