表征的激活区域的大肠杆菌分解代谢物基因激活蛋白(帽)。饱和度和alanine-scanning诱变。
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董妞妞W,周Y, Q, Ebright YW, Ebright RH
表征的激活区域的大肠杆菌分解代谢物基因激活蛋白(帽)。饱和度和alanine-scanning诱变。
J杂志。1994年11月4日,243 (4):595 - 602。
- PubMed ID
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7966284 (在PubMed]
- 文摘
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它提出了表面循环组成的氨基酸残基152年到166年的分解代谢物基因激活蛋白(CAP)大肠杆菌的蛋白质直接接触lac RNA聚合酶的启动子。在这项工作中,我们使用目标饱和突变基因编码的密码子152年至166年,帽,紧随其后的是一个屏幕上,分离出200多个独立的帽子有缺陷的突变体在DNA结合转录激活但不是缺陷。所有孤立single-substitution突变体映射到只是8个氨基酸残基;156、157、158、159、160、162、163和164年。我们建议这些残留定义的全部范围抗原决定基的帽提出CAP-RNA聚合酶的相互作用。此外,我们构建了丙氨酸替换在每个位置残留152到166的上限,我们分析了影响转录激活在lac启动子和DNA结合。丙氨酸替代Thr158导致转录激活的特定缺陷大约8倍。相比之下,丙氨酸替代其他任何残留检测结果超过两个特定的缺陷在转录激活。Thr158我们认为,侧链原子除了Cβlac启动子的转录激活至关重要,我们建议Thr158 OH7伽马使直接接触RNA聚合酶的三元复杂lac启动子、帽和RNA聚合酶。我们进一步得出结论,没有残留之外的其他比Thr158侧链原子C lac启动子的转录激活β必不可少的。