高度持续活跃的突变体的研究显示如何激活受体蛋白质号营。
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只要H, Kerby RL,康拉德M,罗伯茨医生
高度持续活跃的突变体的研究显示如何激活受体蛋白质号营。
J生物化学杂志。2006年1月13日,281(2):1119 - 27所示。Epub 2005年10月31日。
- PubMed ID
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16260780 (在PubMed]
- 文摘
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营受体蛋白(CRP)的大肠杆菌进行构象变化应对营绑定,允许其绑定特定DNA序列。使用一个体内筛选方法同步密码子的随机化后职位127年和128年(两个C-helix残留的蛋白质相互作用营),我们有孤立的一系列小说持续活跃的c反应蛋白变体。序列分析显示,这一群体的变异通常拥有亮氨酸或蛋氨酸在127位置beta-branched氨基酸在128位置。一个特定的变体,T127L / S128I CRP,表现出极高的cAMP-independent DNA结合亲和力比得上cAMP-bound野生型c反应蛋白。进一步的生化分析这种变体和其他显示低浓缩铀(127)和Ile(128)有不同的角色在稳定的活性构象CRP在缺乏阵营。低浓缩铀(127)有助于改善亮氨酸拉链的二聚体界面,导致改变intersubunit交互C-helix地区。相比之下,Ile(128)稳定的适当位置beta4 / beta5循环功能与低浓缩铀(61)。以此类推,营地的结果显示两个直接本地影响绑定激活过程中野生型c反应蛋白:(i) C-helix重新定位通过直接与刺(127)和爵士(128)和(2)随之而来的重新定位beta4 / beta5循环。最后,我们还报告,表达T127L / S128I CRP显著升高摄动大肠杆菌增长即使没有阵营,这表明为什么变异没有前面描述的相对活跃。